要是用引物设计软件比如Primer设计的引物,软件会直接显示Tm值;如果不是的话,可以按下面这个公式计算:大于10bp,Tm=81.5+41[GC%]-[675/引物长度]小于10bp,Tm=[(GC%*总碱基数)*4]+{[(1.00-GC%)*引物长度]*2}变性温度一般是94度,延伸温度72度
有一个经验公式,和引物的C+G个数相关,好像是4*(G+C)-?,?值记不清了。