标记基因和目的基因是连在一起的。
用标记基因筛选基因载体的方法很简单,在表达载体上一般有两个甚至两个以上的标记基因,比如,一个是抗青霉素的基因,一个是抗四环素的基因,将目的基因插入到抗四环素的基因中,那这个表达载体就不能表达出抗四环素的性状了,只能表达出抗青霉素的性状。然后,将表达载体放在含青霉素的培养基上培养,那么,凡是含有表达载体的就能存活下来。
然后将这些能抗抗青霉素的菌落放在含四环素的培养基上,不能存活下来的就是我们所需要的。
具体方法是印章法。也就是用一块无菌的增绒布,在含青霉素的培养上印一下,接种到含四环素的培养上,如果那个菌落不能生长,那就是我们所需要的,然后从含青霉素的培养基中选择。
标记基因一定和目的基因连在一起
因为标记基因是为了在后来检测目的基因是否存在在宿主细胞的DNA上
而且运载体上必须要有标记基因,目的基因,启动子,终止子和复制原点的
如果载有目的基因的运载体没有成功的进入宿主细胞的话
你在最后检测的时候
你的宿主细胞就不会被检测到有目的基因嵌入到该细胞的DNA上的迹象
这也正是标记基因的作用。
用标记基因筛选目的基因载体
是你选择什么样的标记基因
就好像是说如果你的标记基因是抗青霉素的标记基因
那你在最后的检测中
你就需要在培养皿中加入青霉素
那些被标记到的细胞就能够在含有青霉素的培养皿中继续存活
但你需要注意的是
在考虑标记基因之前
你要想想
这种细胞是否本身就含有你要加入的标记基因
因为
如果是的话
你就不能判断在最后检验的时候
到底存活下来的细胞哪些是有目的基因的
哪些是原本的细胞(没有目的基因的)
这个事转基因的题目吧,一般目的基因和标记基因都是连接在一个叫质粒的载体上在载体构建完成后才会转入受体内,所以目的基因和标记基因是连在一起的,不知道你说的连在一起是不是像手拉手一样的状况,如果是就不一定了。第二个问题,目的基因一般都会有特异性的表现,不是有荧光现象就是能抗一些特殊的药物,如kana,氨苄什么的,所以利用目的基因的这些特特殊性就可以筛选出来了
希望可以帮到你啊,嘻嘻......
没办法用培养基筛选,因为重组质粒上的基因(除标记)原质粒上都有。我们老师说是要看导入后哪些能表达,用抗原抗体杂交
鉴定表达没有,然后才选出来
再看看别人怎么说的。