我想问PCR扩增时使用的DNA模板浓度一般多大?加多少?

2024年11月29日 16:26
有2个网友回答
网友(1):

我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度,纯度倒是要注意一下,紫外分光达到1.8即可,不过我们一般也不去检测。
PCR的时候可以设置梯度,分别加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μl。
不要低于0.5μl,也不要高于3μl。选择几个梯度做一下看看哪个效果好就用哪个。有时候为了省钱,就直接用1μl上去P,一般问题不大,出了问题再回头做梯度也不迟。

总而言之,使得模板量在1μl左右最好。

网友(2):

提取DNA后的电泳条带如果不是特别暗,PCR时如果总体系是25μl,DNA模板加0.7~1μl都行,自己摸索下。

做PCRDNA模板太多不好,有点就行~