高效液相色谱法怎样计算检出限和定量限

首先要采集一段基线，看一看波动情况，需要一段稳定的波动，看看最高点和最低点之间的高度。这个就是你的仪器噪音。

然后是将你需要测定的样品进样分析，当信噪比为10的时候，这个浓度就是定量限；当信噪比为3的时候，这个浓度就是检测限。信噪比的意思就是信号/噪音。

比如说，你的噪音高度大约是0.1mV，那么检测限就是你的待测样品逐级稀释至 样品峰高为0.3mV时样品的浓度，定量限则是峰高为1.0mV时的样品浓度。
你可以选择线性最小浓度的样品进样，假设它的浓度是10ug/ml，进样后主峰峰高是10mV，那么你的定量限浓度大约是这个浓度稀释10倍，也就是1ug/ml。而检测限浓度则需要这个浓度再稀释3倍，大约是0.3ug/ml

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用[1]  。

高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

⑥柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物

⑦样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。

首先要采集一段基线，看一看波动情况，需要一段稳定的波动，看看最高点和最低点之间的高度。这个就是你的仪器噪音。
然后是将你需要测定的样品进样分析，当信噪比为10的时候，这个浓度就是定量限；当信噪比为3的时候，这个浓度就是检测限。信噪比的意思就是信号/噪音。

比如说，你的噪音高度大约是0.1mV，那么检测限就是你的待测样品逐级稀释至 样品峰高为0.3mV时样品的浓度，定量限则是峰高为1.0mV时的样品浓度。
你可以选择线性最小浓度的样品进样，假设它的浓度是10ug/ml，进样后主峰峰高是10mV，那么你的定量限浓度大约是这个浓度稀释10倍，也就是1ug/ml。而检测限浓度则需要这个浓度再稀释3倍，大约是0.3ug/ml