首先根据你的实验需要选择相应的载体其次分析你的基因序列以及载体序列上的酶切位点,切记在载体上所选择的酶切位点要和你的基因序列上相一致,并且这两个酶切位点在你的基因序列中并不存在,否则会将基因切断再次就是对基因和载体进行酶切了,基因要是直接用带有酶切位点的引物进行PCR的话就不用再酶切了。酶切之后进行连接,一般都有连接试剂盒的。最后的重组质粒要转化至大肠杆菌中进行扩增,然后提取这个质粒进行酶切鉴定。