求MS培养基的配制步骤,需要详细点的介绍,谢谢!

2024年11月30日 15:29
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激素母液的配制

各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。
2、配制培养基
以配置1L MS培养基为例,按顺序进行如下操作:
1、先在烧杯中放入一些蒸馏水。
2、分别取MS中的母液10ml倒入。
3、一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。
4、加蒸馏水用量筒定溶至1L。
5、按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差。
6、用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8。(有条件的话使用酸度计,比较精确) 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。
1当量HCL配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。
1当量NaOH配制:称取NaOH 4g 配成100ml溶液。
7、称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化。
8、稍微冷却后,分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧。
9、放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右。
10、灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固。
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