细菌涂片怎么制作？

实验准备材料：酒精灯、接种环、染液、载玻片、菌种、生理盐水等

步骤：

1.取一块干净无菌的载玻片，在载玻片中央滴一滴生理盐水。

2.将接种环在火焰上烧灼灭菌，要保证接种环是无菌的。

3.待接种环冷却后从固体培养基上挑取少许菌落，注意挑取菌落不宜太多，避免造成细菌堆积。

4.将接种环挑取的菌落与置于载玻片的生理盐水上混匀，形成直径约1cm的涂面，要薄而均匀，使细菌呈现单层分布，涂匀后再次将接种环在酒精灯上烧灼灭菌。

5.干燥：置于室温自然晾干或者使用吹风机或者置于酒精灯火焰上方晃动使其干燥。

6.固定涂片：干燥后，手拿载玻片的一端将涂面向上在火焰上快速来回均匀通过2-3次，温度不宜过高，以玻片反面触及手背部皮肤感觉热而不烫为宜，时间不宜太长。

扩展资料：

实验注意事项：

1.接种环必须要圆滑平整，使用前后必须在酒精灯上烧灼灭菌。

2.注意做好实验过程记录，实验名称及日期。

3.涂片不要太厚，要均匀。

4.涂片固定时一定要把握时间和温度，避免温度过高引起菌体破坏。

1、涂片的制作有一定要求，即涂片不能太厚，细菌在涂片中应呈单层分布。2、为了观察细菌的典型形态，应取处于对数生长期的细菌进行涂片。

步骤及注意事项：
1．涂片：取清洁无油玻片一块，置火焰上通过数次，用烧灼并冷却了的接种环取菌液1～2环，均匀涂布于载玻片中央（直径1～1.5 cm）。
玻片无菌，接种环烧灼并冷却后使用，涂布应均匀。

2．干燥：涂片放室温自然干燥；也可将标本面向上，在离火焰约15 cm高处微微加热烘干，切勿靠近火焰；或用电吹风吹干。

3．固定：常用加热固定法，其主要目的之一是使菌体较牢固粘附于载玻片，防止其在染色时被染液和水冲掉，其二是杀死细菌；其三是使菌体蛋白质变性凝固，从而使细菌形态固定。其四是可改变菌体对染料的通透性，从而使细菌易于着色。固定的方法是手执载玻片一端，标本面向上，在火焰外焰上水平地以钟摆速度来回通过3次，注意温度不宜太高，以玻片反面触及手背部皮肤感觉热而不烫为宜。

注：

若取菌落涂片，则需先用接种环取0.9% 氯化纳（NaCl）1～2环置载玻片上，再用烧灼且已冷却的接种环取菌落少许放在0.9% NaCl内研磨均匀，涂成直径约1～1.5 cm的菌膜。接种环经火焰灭菌后方可放回原处。其它步骤同上2，3

1.采集从富含有机质的小便池采集浮在液面部分的膜和液体,用双层白色绸布过滤。将滤液镜检,若细菌三型比例适当,即可采用。2.固定在90毫升滤液中,加入10毫升甲醛液。摇匀,固定8小时以上。3.水洗固定后的材料采用离心沉淀法,用蒸馏水换掉固定液,即得到细菌三型原液。离心沉淀时间每次5分钟,共四次。4.涂片先将学生用文字墨汁用数层滤纸过滤,再将细菌三型原液与适量的墨汁滤液混合均匀。然后将混合液均匀涂布于洁净的载玻片上。在30℃左右的恒温箱中烘干。5.封盖将镜检玻片上材料三型齐全,而且分布均匀,背景清洁的部分,即用中性树胶封盖。制好后的涂片细菌呈白色,底色为黑色。