我是荧光定量pcr初学者,现在想做定量试验,最近做了个标准曲线,可是内参和目的基因的点都不在线上。

2024年12月04日 23:42
有3个网友回答
网友(1):

可以78℃读板,这样Ct值就只是产物的值了,另外你的NTC可能是污染了,稀释的过程中也要防止污染,尤其是标准品,

网友(2):

从溶解曲线上看,确实有非特异性的扩增,在75度左右的小峰。样本的浓度越低,这个非特异的干扰就越大。最好不要用Sybr Green做。改用探针吧

网友(3):

qPCR手抖一下就好几倍的差别甩出去的 啥样的结果都挺正常 多做几次取个最稳定的结果就行了