用芦丁测总黄酮含量的时候，含量测定方法的考察是什么啊？应该怎么做？我只有20mg芦丁，不敢乱用。。

芦丁标准品（中国药品生物制定检定所）；95%乙醇；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂，所用试剂均为分析纯；山楂。
2 实验部分
2.1对照品及供试品溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备
精确称取芦丁对照品0.005g，置于小烧杯中，用体积分数70%的乙醇溶解并定量转移至25mL容量瓶中定容，摇匀，即得浓度为0.200mg/mL的芦丁标准品溶液。
2.1.2 供试品溶液的制备
称取干燥至恒重的山楂5.0g，置于100ml带塞锥形瓶中，按实验设计条件进行超声提取，提取液减压抽滤，取其滤液。将滤液定量转移至50ml容量瓶中，加相同浓度的乙醇定容至刻度，摇匀即得。
2.2 总黄酮含量测定方法的建立
2.2.1 测定波长的选择
精密量取芦丁对照品溶液1.50ml，置于10ml容量瓶中，加入体积分数70%乙醇至5ml。加5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，放置6min；再加入10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，放置6min；加入1.0mol/L的氢氧化钠溶液4.00ml，加水至刻度，摇匀，放置15min。以不加芦丁对照品溶液作为空白。选择于紫外分光光度计在400nm-600nm波长范围内扫描。
2.2.2 线性实验
精密量取芦丁对照品溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL，分别置于25mL容量瓶中，各加入体积分数70%乙醇至10ml。加5%亚硝酸钠溶液1.00mL，摇匀，放置6min；加10%硝酸铝溶液1.00mL，摇匀，放置6min；加4%氢氧化钠溶液10.00mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15min。以不加芦丁对照品溶液为空白，采用分光光度法在510nm波长处测定吸光度，以芦丁浓度(mg/ml)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线。
2.2.3 精密度实验
准确吸取芦丁对照品溶液2.00ml，置于10ml的容量瓶中，加入一定量体积分数70%乙醇使成5mL。先加入5%的亚硝酸钠溶液0.30mL，摇匀，放置6min；再加入10%的硝酸铝溶液0.30mL，摇匀，再放置6min；加1.0mol/L的氢氧化钠溶液4.00mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15min。按以上方法连续测六次。
2.3 样品中黄酮的用优化后的方法提取中黄酮，用比色法测定其含量即可。