什么叫阳性克隆筛选法? 请打击帮帮忙!!

2025年03月01日 17:22
有2个网友回答
网友(1):

这是一种分子生物学的方法。
比如,在大肠杆菌中导入一个目的基因,要怎样才知道有没有导入进去呢?所以要同时导入一个报告基因(目的基因和报告基因位于同一个载体上)。导入了报告基因的大肠杆菌在含抑制性物质的培养基上就可以生长,而不含报告基因的大肠杆菌(就是转化失败的)就不能生长。这样过了两三天后,在培养基上看见的菌落就是阳性科隆。这一过程就是阳性科隆筛选。一般选用的报告基因像青霉素抗性基因,链霉素抗性基因等等。
如果还想了解得更详细,就去买本分子生物学实验书或入门书籍看看就明白了。

网友(2):

目的建立一个简便、可靠的重组阳性克隆的筛选方法.方法应用扩增小鼠生精细胞凋亡相关基因时使用的引物,以基因重组扩增后得到的菌落为模板,直接进行PCR扩增.结果在筛选的阳性菌落中可扩增到与小鼠凋亡相关基因片段大小一致的阳性条带;以阳性克隆提取质粒进一步进行PCR和酶切鉴定及序列分析,证明结果正确.结论菌落PCR是一种简便、快速、可靠、有效的筛选重组阳性克隆的方法.