以下是从动物病毒中快速提取DNA的方法,请参考该方案采用离心操作,适合于从动物组织样品中快速提取病毒基因组DNA。以下步骤都在室温下进行。 1. 取50-100mg的动物组织加入约3倍体积的生理盐水进行匀浆,充分匀浆后10,000rpm离心2min去除残余组织。 2. 取150 μl上清液至新的洁净离心管中。 3. 加入500 μl DNA提取液至上清液中,颠倒混匀,室温静置5-10min裂解病毒。 4. 把DNA吸附柱装在2ml收集管中,把裂解后的液体全部转移至DNA吸附柱中,10,000 rpm离心1 min。 5. 倒弃滤液,把DNA吸附柱装回收集管中,加入400 μl洗涤液至DNA吸附柱中,10,000 rpm离心1 min。注:洗涤液初次使用前请先加入48 ml无水乙醇。使用完立即盖上盖,以防乙醇挥发。 6. 重复步骤5。 7. 倒弃收集管中的滤液,把DNA吸附柱装回收集管中,10,000 rpm离心3 min。 8. 把DNA吸附柱装在新的洁净离心管中,加入30-50 μl洗脱液至吸附柱中央,静置1-2min,10,000 rpm离心1min,所得即为DNA溶液,可用于后续实验,若暂时不用,应于-20 ℃可储存。