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好吧问答库 > 紧急求助，有谁用过promega的总RNA提取试剂盒

紧急求助，有谁用过promega的总RNA提取试剂盒

2025年03月16日 09:00

有1个网友回答

网友（1）：

promega的试剂盒我用了1个多月，提总RNA很好的，我们实验室一直在用，我们提取的RNA跑电泳很好，RT－PCR之后的actin也很好，说明我们的提取没有问题。至于最后我们是溶于30ulDEPC水中。我其中的步骤如下： 1.在培养皿中加入2ml Trizol，裂解细胞5min。 1.转移裂解液到2只EP管中，加入0.2ml氯仿，剧烈震荡15s，放置3min，4℃12000转离心15min。 2.吸取上层水相到另2只EP管中，加0.625ml异丙醇，混匀，4℃放置2小时，4℃12000转离心10min，弃上清，可见少量白色沉淀贴于管底。 3.每只EP管加1.5ml冰乙醇，振荡，4℃7500转离心5min。 4.倒去上面液体，自然晾干10min，每管30μl，-80℃保存。若短期保存，上面就行了，若长期应该逆转录成CDNA保存。跑出的电泳带用肉眼根本看不出亮度的差别，应该说差别不大

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