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材料和方法
蛋白制备
在nonlabelled和统一15N和15N/13C-labelled资格认证- 10
与ESAT - 6准备如前所述（润沙等人，
2002年，2004年）。此外，13C/1H HMQC - NOESY谱光谱
获得从复杂的样品中，只有
nonaromatic残留一律15N/13C标签。这是
实现从大肠杆菌两个蛋白制备
生长在50毫克/升的补充标签基本培养基
L -组氨酸，L -酪氨酸，L -苯丙氨酸和L -色氨酸（卡尔
等，2003）。资格认证的标记物混合- 10必然
nonlabelled杆菌ESAT - 6和反之亦然被混合产生的副
纯化的蛋白质等物质在室温下的解决方案
磷酸二氢钠在25毫米，100毫米和0.02％氯化钠（瓦特/ V）的氮化钠，pH值6.5，
与在5-15毫米的单个蛋白浓度。那个
复杂集中超滤给0.35毫升核磁共振
样本含有0.9 - 1.5mm的资格认证10。杆菌ESAT - 6无论是复杂的
90％H2O/10％重水或100％的重水适当的缓冲区。
蛋白质相应的资格认证截断变异- 10缺乏
最后的14 C -末端残基（Asp87 - Phe100）的制备
1 pET28a中的大肠杆菌表达载体，生产的
采用PCR技术为基础的方法，基本上如前所述
（润沙等人，2002年）。纯化的表达产物
通过两个阶段，用10毫升调Q Sepharose柱（伦肖
等人，2002年），与截断资格认证，10列中洗脱
50毫米氯化钠步骤在pH 8.0和20毫米在pH 5.8氯化钠的一步。
ç -末期截断杆菌ESAT - 6对应的残留1-84
产生作为副产品期间全长净化产品
蛋白质。这两个品种的分隔离子交换（伦肖
等人，2002年），同种洗脱截断从列
在100毫米氯化钠一步。
核磁共振光谱
核磁共振光谱，在351C上获得或800MHz的瓦里安
伊诺瓦或600MHz的布鲁克Avance系列光谱仪。二维和三维
光谱记录获得基本完成序列特异性
骨干和侧链任务的资格认证- 10与ESAT - 6
复杂，获取结构的构象限制
计算如下：上半年TOCSY和NOESY谱; 15N/1H HSQC，
TOCSY - HSQC和NOESY谱，HSQC，13C/1H胆管癌- TOCSY和HMQCNOESY;
和15N/13C/1H HNCACB，CBCA（CO）的NH和HBHA（CBCACO）
新罕布什尔州如前所述（润沙等人，2004年）。
三维NMR数据进行了处理使用NMRPipe（Delaglio等，
1995年），与线性预测用于扩展有效的收购
高达1.5倍倍F1和F2和温和的决议
在所有使用方面的应用转向加强正弦平方
功能。除了线性预测，二维遗漏
光谱也同样处理或使用瓦里安布鲁克软件。
所有的光谱进行了分析，使用该程序XEASY（巴特尔斯
等，1995）。

您这这个这么的长就给那么点儿分，哎……

估计没人翻译，看着就觉得~~~即使翻译，也是个机器~~